各位来宾下午好！因为没有做事前准备，我以为是学术会议，最后知道是沙龙，我是专家，就以专家的本来面目讲一下肿瘤的一些进展，特别是我的研究团队的一些进展。

      我本人可以说是我们国家培养出来的从第一届恢复高考的学生，在中国完成了学士、硕士、博士，后到美国工作、学习了六年，回国有20年，属于老海归了。

      回国后，其实我是双重身份，又是医生，又是做科学研究的，在科学研究方面从事肿瘤做了两个方面，一个方面是我的老本行妇科肿瘤，另外一个是大肿瘤、肿瘤转移，今天讲肿瘤转移方面的内容。我在国外主要从事肿瘤转移的研究，担任三个973的肿瘤研究项目，对肿瘤转移有一些感悟。

      肿瘤转移可以这样说，肿瘤两大问题，一是发现，发现非常困难，发现、发展搞清楚了，就解决了，但是发现以后，恶性肿瘤复发转移，恶性肿瘤解决了，恶性肿瘤就变成良性肿瘤了。

      世界卫生组织最新统计，2014年恶性肿瘤发病高达1200万，其中80%在发展中国家，近年来肿瘤发病因为老年化逐年升高，死亡人数保守估计700万。确切证据表明，90%以上的恶性肿瘤最终死于复发转移，肿瘤转移成为攻克肿瘤的重大难题。

      恶性肿瘤和良性肿瘤特点不一样，良性肿瘤是一个局限性生长，切除以后就解决问题了。恶性肿瘤是侵袭性生长，像螃蟹一样，cancer早期就是“螃蟹”这个名词，这是手术不能解决问题。所以转移是恶性肿瘤的基本特征。

      对于肿瘤来说，冰山以上当作次生长原发肿瘤，这个肿瘤通过临床手段，手术化疗、放疗还是容易清除掉，但是微小的潜伏病灶，像水下巨大的冰山，有机会就会复发转移，最终危害患者生命。

      肿瘤转移是恶性肿瘤难治性的根本原因，肝脏、锁骨上淋巴结、骨转移，最终导致肿瘤死亡重要原因。

      肿瘤研究状况不容乐观，有四个方面困扰我们，缺乏理想的动物模型，不可能肿瘤转移马上用到人身上，在人身上做研究是后期的事情，第二是靶向分子就是靶向治疗，筛选方法不尽如人意。肿瘤转移特别要有一个很好的载体，就是精准治疗，把靶向药物或者基因治疗的东西，要进行运载，再就是临床上面的验证和转化，我们显得力不从心。

      在动物模型研究方面，我们研究团队过去做了很多研究，特别是一个经典的模型，我们叫做转基因小组模型。我们知道，眼黑色素瘤就算把眼球挖掉了，哪怕20年复发，无一例外是肝脏转移，百分之百肝脏转移。我想搞清楚这个规律，对小鼠接种了SV40，在它的胚胎期转基因进去，出生26天，肝脏已经转移。这个肿瘤是自身长了，没有排斥现象，SV40可以做一个标记，有了这个模型可以很好演绎肿瘤转移整个过程。这个模型得到很好的承认，发表在《BLOOD》。

      同时建立一系列的模型，各种各样的肿瘤需要的模型。

      第三个模型，我们用K-ras+Pten组合，可以诱发特殊的妇科性肿瘤，比如子宫内膜癌，诱导以后，通过基因变异进行阻断，而且靶向药物也可用来产生。

      有了动物模型，需要靶向分子筛选，我们知道肿瘤在人的身上，通过临床治疗以后，一个病人达到临床治愈以后，实际上他是带瘤细胞健康生存，他身上还有瘤细胞，不知道什么时候会复发转移，大量的药物，比如抗癌药、免疫制剂、抗血管生成剂等，第一层次抑制肿瘤细胞生长，肿瘤细胞的增殖和凋亡达到动态平衡，临床治愈阶段就是这样做。

      第二层次，把残存的肿瘤细胞清除掉，这是最理想的。这是第二层次。

      现在第一层次、第二层次这样的研究，我们都在做。

      我们做了肿瘤相关血管、淋巴管的研究进展，我们发现肿瘤里面的血管跟外面的血管不一样，血管内皮单个细胞切割下来，通过微量DNA扩增、基因芯片分析以后，我们获得了细胞因子，我们叫做TIM3。

      肿瘤从原发肿瘤到转移的地方，要通过脉管系统，有非常好的免疫屏障系统，使肿瘤细胞形成免疫逃逸。所以TIM3可以作为肿瘤抗体反应的一个靶分子，我们正在做研究，发表在今年《GEM》的文章上面。

      我们用淋巴管Sema4C，淋巴管被动接受肿瘤细胞，淋巴管有一个免疫小区，Sema4C调控免疫小区，出现免疫缺陷，肿瘤细胞免疫逃逸，在全身转移。通过我们对Sema4C研究，可以阻断肿瘤转移。

     敲除Sema4C，淋巴管就消失了，水肿了，我们发现这个Sema4C特殊功能是乳腺癌的标记，乳腺癌是全世界的大癌，没有标记物。初步发现，它的准确率可以达到90%，扩大样本还可以达到80%，现在这个文章正在《柳叶刀》审稿，这是很有希望的一个检测试剂。

      我们针对肿瘤转移的一个靶向肽，抗体是大分子，靶向肽是短肽，我通过们筛除一系列的短肽，其中一个5个氨基酸的短肽可以识别微小的转移病灶，就是第二层次，获得了临床专利。

      上面是它的三级结构，它可以标记显微镜下面还不能辨认的肿瘤细胞，一般在一个高倍视野小于5个肿瘤细胞的话，我们认为是看到1型细胞，超过5个1型细胞作为瘤，可以标记了，我们这个文章以封面杂志发表在《Clinial Cancer》。

    TMTP1挂上一些毒性物质，挂上Trail、TAT-NBD和TAT-白喉毒素等，这样可以攻击肿瘤细胞，我们发表了一系列的文章。跟Trail结合以后，可以抑制肿瘤转移，这个和白喉毒素，动物试验肿瘤生长比较缓慢。

      小分子抑制剂，我们找到一个靶点，很快可以合成小分子抑制剂，但是这个不是我们的特色，我们国家是地大物博，我们有很多物种，在华北制药每年有人到外面去采集样本，特别是日本人，日本人每年都会派人来搜集我们的样本。因为我们国家很多好的东西，但是收集上来以后，不知道这些东西干什么用的，我们通过把整个植物库进行筛选，筛选出一个Rapa小样,开发抑制卵巢癌生长的一个小分子抑制剂，我们这个文章在2015年的《Autophagy》发表。通过我们国家最好的植物资源走出一条路，筛查小分子抑制剂。

      刚才谈到动物模型和靶向分子，下一步必须要有治疗载体。过去用的基因载体，我们用的是五型腺病毒，但是它没有特异性，后来开发了显示性、抑制性、复制性病毒。一个片断敲除以后，在正常细胞当中就是感冒，对正常细胞不杀伤，但是肿瘤细胞当中敲除Rb基因，可以修补起来，因为肿瘤细胞表达大量的Rb基因，可以启动，导致癌细胞溶解。

      同时在E3基因上转载多基因，肿瘤是多基因表达变化，多靶点攻击肿瘤细胞，这个载体是我们现实独有的载体。

      靶向肽，刚才谈到的TMTP1是一个靶向肽，挂上以后，可以带到特异性肿瘤细胞当中，攻击杀伤肿瘤细胞。

      这个载体到了现阶段，又有新的肿瘤基因治疗载体，分子编辑技术，说起来大家都是很热的，锌指核酶、转录激活因子样效应物核酸酶TALEN、CRISPR/Cas9，我们有合成的三种编辑方法。

      通过TALEN对宫颈癌HPV病毒整合进去，通过剪辑以后，HPV病毒病变，通过剪辑以后可以恢复正常，这个研究很快，投稿15天，在JCI封面杂志上发表，目前正在准备伦理，这是我们医院在人身上做的单中心研究。

      第四个方面，拮抗肿瘤转移临床验证和转化，体内肿瘤细胞通过最好的三维彩超、MRI、PET/CT，对于小于0.5公分的病灶很难发现，很难治愈，不知道什么时候转移，需要非常精准的方法，目前最好的方法是用TMTP1，在动物身上可以很好标记转移肿瘤。带上Ga-NOTA，在卵巢癌、宫颈癌可以很好的标记。

      我们跟北京协和医院合作，目前PET/CT用氟脱氧葡萄糖标记的，可以标记肿瘤细胞。TMTP1对肿瘤细胞标记，是不一样的。

     但是氟脱氧葡萄糖对血管供应比较旺盛的，比如肝、脾、胰腺等等这些地方对隐性包块很难鉴别，TMTP1针对转移肿瘤细胞可以很好鉴别隐性包块。

      TMTP1是短肽小分子，很容易进入到血管屏障，对脑转移病灶可以很好标记。像乳腺癌、宫颈癌是淋巴转移，目前医生尽量去清淋巴，但是不到20%的淋巴转移，过度治疗，宫颈癌治疗以后引起橡皮手，希望精准摘除转移淋巴结，因为淋巴是免疫系统，清除了不见得是好事，可以限制肿瘤转移。所以我们做了一个研究工作，把TMTP1通过纳米和荧光素、ICT标记出来，在宫颈进行注射，注射以后，标记以后，显示盆腔里面的淋巴结呈荧光，通过腹腔镜可以精准摘除出来淋巴结，可以精准淋巴清除，不是过度治疗。

      在手术当中可以看到荧光显色的淋巴可以拿掉，没有显色的淋巴可以保留下来。这是我们正在临床过程当中验证做的研究。

      这是阴道镜，通过碘染色是不精准的，通过阴道镜可以看到宫颈的图片，要非常有经验的医生才能判读，通过碘染色，不着色的地方活检。通过TMTP1通过荧光素，可以看到肿瘤细胞着色，提示要处理了。

      还有一个研究的时间比较长，叫ADV-TK胸苷激酶，和我们所做这个基因载体、病毒载体，结合其他形成ADV-TK制剂，可以取代肿瘤细胞生长的DNA合成，可以杀伤肿瘤细胞。这个药物获得临床专利。

      临床一期实验，很好的效率，一期试验没有毒性，没有可评价和毒副作品。二期实验头颈部、肝癌、脑胶质瘤，肝癌有限控制率71%，头颈部达到89%，脑胶质瘤达到80%。这是头颈部的肿瘤治疗前和治疗后。这是骨转移病人治疗以后，很好的修复。

      脑胶质瘤现在是无药可治，最多延长三个月，我们治疗以后，中性恢复，脑水肿消失，明显延长生存时间。

      肝癌肝转移病人，傅彪是晚期肝癌，通过肝移植没有成功，ADV-TK做完以后，人身上做完25例，有很好的延长时间。我们就是来挑战国际的米兰标准。

      超过7公分肿瘤，我们很快半年多复发，一年死亡，通过我们把供肝移植上去之前，通过ADV-TK基因，在腹膜内治疗以后，供肝放上去，这个病人观察70个月，还在存活，是工地的老板，我们这个研究获得了国家科学研究二等奖，现在这个研究正在做临床三期试验。

      这是我们工作的一部分，作为肿瘤转移确实是要攻克肿瘤的一个重大难题，在这个方面，我们通过研究肿瘤，走了一些脚印，也是为攻克肿瘤做出了一些贡献。谢谢大家！